该文章是从Borgron复制的。在抗体纯化过程中，消除聚集体始终是头痛。聚集体的存在对产品质量有严重影响，并增加了免疫原性的风险。作为最常用的抗体纯化过程中的捕获步骤，蛋白A亲和色谱对于捕获抗体非常有效，并且可以有效消除与该过程有关的杂质，例如宿主细胞蛋白（HCP）和DNA。然而，蛋白A亲和色谱通过消除抗体聚集体具有一定的局限性。聚集体通常比单体更接近彼此，并且通过调整洗脱pH值仍然很难实现足够的分离。因此，消除聚集体通常是基于培养基和细纯化的后续步骤，而聚集的高聚集可以为随后的纯化过程带来重要的挑战。今天我们讨论新的str文献中引入的竞技场将有助于在蛋白质亲和力色谱纯化过程中更有效地消除抗体聚集。氯化钙研究设备/氯化钠/聚乙二醇氯化钙（PEP）开发了一种创新的方法，可以极大地提高蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质的效果。该方法通过添加聚乙烯乙二醇（PEG）和氯化钙/氯化钙的组合与洗涤和Elinity缓冲液相结合并优化了额外的浓度，从而实现了单体和聚集体的几乎完全分离。主要分析：1。在这项研究中，在蛋白质AISER A的最大形式的效果下，研究人员试图观察EPR对蛋白质亲和力色谱弹性曲线的影响，以在选择缓冲液中添加不同浓度的PEG（1.5％，3％，5％和10％）。作为色谱中广泛使用的添加剂，PEG通常可以imp将单体和聚集体分辨率在羟基磷灰石柱，离子交换和多模式色谱中的分辨率。这是因为PEG可以改善这些柱中的蛋白质保留，这随着蛋白质分子的大小增加。但是，即使它在蛋白A亲和色谱中添加了10％的PEG，单体和聚集体的分辨率也是相同的。尽管它没有改善，但靶抗体的保留时间略有增加，并在洗脱的峰值中变得更加锐利。这一发现解释了为什么以前没有关于使用PEG来消除蛋白质色谱A中的聚集体的文献。2。在一项研究中，由于氯化钙的影响最大的蛋白质A弹性A的影响，研究人员发现，在增加500 mm的现场盐（例如氯化钙或钙化的氯化物或氯化钙）时，添加了对Hersodimerss的分辨率和HOMORSOGION的添加。研究人员认为Se Caotropic盐通过改变抗体和蛋白质配体A之间的疏水作用来提高填充选择性。根据这项研究，本文档进一步探讨了氯化钙在消除聚集体中的可能应用。该研究比较了氯化钙浓度（250毫米，500毫米，750）。 MM和1 M）以蛋白质亲和力色谱扩大的最大形式的作用表明，氯化钙实际上改善了单体和聚集体的分辨率，这表明氯化钙500 mm是最好的。操作提案：研究表明，仅将PEG用作添加剂不能提高蛋白质亲和力色谱A抗体单体和聚集体的分离效应。作为一种添加剂，氯化钙可以通过调整其疏水效应来改善分辨率，尤其是在消除抗体聚集体时，可以改善分辨率。蛋白A色谱法的通过色谱法允许将氯化钠或氯化钠添加到Elución缓冲液和5％PEP中，以改善聚集消除效果。必须根据抗体特性和聚集含量来调整盐和PEG浓度。我们建议您首先进行小型调查。氯化钙对分辨率具有积极影响，但也可能对蛋白质活性产生特定的影响。在实验中需要进行条件检测和优化参数，并进行积分评估。 Optimized parameters: concentration range ofPEG: Example 1.5%, 3%, 5%, 10%of calcium chloride concentration range: Example 250 mm, 500 mm, 750 mm sodium chloride concentration range, 1 m: Example: In this case, the combination of 250 mm, 500 mm, 600 mm, 750 mm, calcium chloride 500 mm or 750 mm sod The separation effect.该方法的优点：显着提高消除效果：通过添加500 mm氯化钙和5％的PEG ToElución缓冲液，洗脱率的聚合含量从20％降低至3-4％。氯化钙/氯化钙/氯化钙在适当浓度下显示出显着的协同作用，从而改善了单体和聚集体之间的分离效应。改善了该过程的鲁棒性：此方法减少了蛋白质A亲和力A色谱库中的聚集含量，从而降低了后净纯化的压力，并改善了一般纯化过程的稳健性。摘要：将PEG和氯化钙/氯化钙的组合添加到蛋白质色谱中，以eluinte可以显着改善消除聚集的效果，同时保持高抗体回收率。此方法易于操作，它可以直接应用于现有过程，并提供新的想法以优化抗体纯化过程。相关产品Yuan Zhang等人。 ，提高消除能力的方法NATE聚集，蛋白质表达和纯化158（2019）65-73的蛋白质色谱A。关于Borgloben Borgloben的蛋白质A。它成立于2008年。这是一家高科技公司，专注于提供高质量的色谱介质用于分离和纯化。作为中国第一家公司之一，它具有产生大规模分离和净化手段的能力。 Borglon Cover提供了各种类型的纯化介质，包括产品亲和力色谱，离子交换色谱，凝胶过滤色谱，疏水性色谱，多模式色谱中，揭示了阶段色谱中的色谱，预先安装的柱子，整体柱，分离的培养物，微型培养和培养培养的培养和培养的培养方法和培养的培养方法和培养的培养。细胞过程。这些产品和服务广泛用于许多领域，例如抗体纯化，疫苗纯化，INS重组蛋白的钙纯化，质粒和纯化。 #antibody #protein亲和力色谱法#bispecificinibury纯化